ABSTRACTTitle. Die Wirksamkeit von alkoholfreien Chlorhexidin in der Höhe von Streptococcus mutans Verringerung
Zweck: die antimikrobiellen Eigenschaften von alkoholfreien Chlorhexidin vergleichen mit anderen antimikrobiellen Mundspülungen
. Methoden: Streptococcus mutans (GS5-Stamm) wurde auf Nährböden gezüchtet und in einem sterilen Kulturmedium Trypticase Sojabrühe (TSB), ergänzt mit Hefeextrakt resuspendiert. Vier einzigartige Experimente wurden durchgeführt, jeder Zugabe der Inokula der Bakteriensuspension auf die Test antimikrobielle Mittel
Ergebnisse:. Experiment # 1: Das Wachstum von S. mutans wurde vollständig gehemmt bei 5% und 1% Konzentrationen von alkoholfreien Chlorhexidin (AFC) und alkoholhaltigen Chlorhexidin (CHX). Das Bakterienwachstum kam es bei allen anderen Verdünnungen mit der bemerkenswertesten in 1% Biotene & reg; (OD max = 1,383 nm), gefolgt von 0,01% Biotene & reg; (OD max = 1,328). Die größte Verdopplungszeit betrug 0,01% CHX bei 2,1013 hr
Experiment # 2:. Generationsdauer und OD max für alle Verdünnungen der verschiedenen Reagenzien ähnlich waren
Experiment # 3:. 5 Minute kurz -term Exposition von unverdünntem CHX hemmte das Wachstum von S. mutans. AFC hemmte das Wachstum von Bakterien für 6 Stunden. Die OD max und Verdopplungszeit waren 1,288 und 1,1213 h betrugen. Die OD max und Generationszeit für Biotene & reg; kurzzeitige Exposition von unverdünntem CHX und AFC das Wachstum von S. mutans 5 Minuten gesperrt: waren 0,891 und 1,5516 h bzw.
Experiment # 4.. Das Bakterienwachstum kam es bei allen anderen Verdünnungen mit der bemerkenswertesten in voller Stärke Biotene & reg; (OD max = 1.629), gefolgt von 1% Ethanol (OD max = 1,598). Die größte Verdopplungszeit betrug 5% Ethanol bei 1.706 hr
Schlussfolgerungen:.. Alkoholfreie Chlorhexidine bakterielle Wachstum von S. mutans bei der Unterdrückung und daher wirksam ist, ist eine praktikable Alternative zu alkoholhaltigen Chlorhexidine
INTRODUCTIONAntimicrobial Mund-Spüllösungen werden in vielen klinischen Situationen sowohl für prophylaktische und therapeutische Zwecke (1) verwendet. Insbesondere haben Mundspülungen ein wichtiger adjunctive Verfahren gute mechanische Mundhygiene oder in der Prävention von Infektionen im Anschluß an intraoralen Bakterien aus chirurgischen Verfahren oder Immunsuppression durch Strahlung auf den Kopf geworden /neck.1,4,5
< p> Chlorhexidingluconat (CHX), ein Breitspektrum-Antibiotikum, ist eines der am häufigsten verwendeten antiseptische Mittel in umfassende zahnärztliche care.5 Wirksam gegen beide Gram-positive und Gram-negative Mikroorganismen, Pilzen und einigen Viren, es wurde gezeigt Plaquebildung zu hemmen, Zahnfleischentzündungen reduzieren und Zahn caries.3,5 verhindern, darüber hinaus in oralen Anwendung ist CHX frei von systemischer Toxizität und mikrobiellen Resistenz oder Veränderungen der oralen Mikrobiota jedoch nicht occur.8,11, die verlängerte Verwendung von CHX ist aufgrund der Entwicklung von extrinsischen Zahn und Zunge Verfärbungen begrenzt, sowie Veränderungen im Geschmack führenden Daher Patienten compliance.2,3,5,7,9,11 zu einer verminderten, die Mehrheit des Zahnarztes lange nicht zu empfehlen -term täglichen Gebrauch von CHX als Mund-rinse.11 Gingival Schuppung und schmerzhafte Schleimhaut haben auch in schweren cases.1,5
Aktuelle Literatur unterstützt den täglichen Gebrauch von 0,12% oder 0,2% CHX als Antiseptikum berichtet Mittel. Jedoch ist eine zusätzliche limitierende Faktor ist, dass routinemäßig verwendet Chlorhexidin Mundspülungen enthalten Alkohol, die Schmerzen verursachen können, Reizungen und schädlich für die Patienten mit Mukositis, Patienten, Kopf /Hals-Strahlentherapie, kleinen Kindern, Patienten mit geschwächtem Immunsystem oder Alkoholikern erholt. Potentiell unerwünschte Wirkungen von alkoholhaltigen CHX Mundspülung führte zur Formulierung eines neuen alkoholfreien 0,12% CHX (AFC) Mund-rinse.1,2,11
Biotene & reg; ist ein alkoholfreies Mundspülung, die viele der Symptome von strahlungsinduzierten Xerostomie verbessern kann. Es wirkt durch ein antimikrobielles Enzymsystem in der Mundhöhle erzeugen, die die Zellwände von Plaque-bildenden Bakterien durchdringt, so dass sie nur gingival zu dem gumline.12 Dieses Enzym-System besteht aus angeborenen menschlichen Speichel Abwehr-Proteine zu zerstören; Lysozym, Lactoferrin und Peroxidase. Lactoferrin ist ein eisenbindendes Glykoprotein, das bakterizide Aktivität gegen eine Vielzahl von Bakterien in eisenfreien Form zeigt, apo-LF und Bacteriostasis durch Eisen sequestration.6,10
Sowohl AFC und Biotene & reg; sind im Handel erhältlich verwendet antimikrobielle Mittel der Mundhygiene zu verbessern und bakterielle Infektion zu verhindern. Allerdings haben nur wenige Studien über die Wirksamkeit von AFC konzentriert als eine tragfähige antimikrobielle Mundspülung.
Das Ziel dieser Untersuchung war es, die antimikrobiellen Eigenschaften von alkoholfreien Chlorhexidingluconat mit anderen antimikrobiellen Mundspülungen zu vergleichen.
Material und Methoden
Bakterienarten: Artikel die für diese Studie ausgewählten Bakterien wird oral in Speichel, Weichgewebeoberflächen und im Dental Biofilm gefunden; Streptococcus mutans (GS5 Stamm) Messungen der optischen Dichte. Als Mikroorganismen wachsen, erhöhen sie die Trübung ihres Wachstumsmediums. die Trübung des Mediums im Laufe der Zeit eine optische Dichtekurve erzeugt werden kann durch die Messung. Die Kurve spiegelt das Wachstum (erhöhte Konzentration) des Organismus von Interesse Bioscreen ZUBEREITUNG:. Im ersten Experiment vier Verdünnungen, 5%, 1%, 0,1% und 0,01% in TSB, die jeweils AFC, CHX und Biotene & reg; wurden gemacht. Dieselben Verdünnungen wurden mit destilliertem Wasser als Kontrolle hergestellt. Die Inokula der Bakteriensuspension wurden zu den verdünnten Reagenzien hinzugefügt und kurz verwirbelt. Das zweite Experiment getestet, um die kurzzeitige Exposition von zwei Verdünnungen, 5% und 1% in TSB, die jeweils AFC, CHX und Biotene & reg ;. Eine 5% -ige Verdünnung mit destilliertem Wasser als Kontrolle hergestellt. Inokula (1000 uL) der Bakteriensuspension wurden bei ~ 13 000 UpM für 1 Minute zentrifugiert. Die Testreagenzien (1000 ul) wurden dann zu dem Bakterienpellet zugegeben und gevortext. Alle Verdünnungen wurden für 30 Minuten bei Raumtemperatur einzustellen. Jeder wurde dann zentrifugiert, gefolgt von Reagenz Entfernung, MTSB Wäsche, Wirbel und Zentrifuge. Das Pellet gebildet wurde dann in 1000 uL MTSB suspendiert und verwirbelt Die Reagenzien in dem dritten Experiment wurden unverdünnt (100%) Lösungen von AFC, CHX, Biotene & reg. und destilliertes Wasser. Im vierten Versuch wurden sie unverdünnt Lösungen von AFC, CHX, Biotene & reg; und destilliertem Wasser und vier Verdünnungen von 1%, 5%, 11,6% und 15%, jeweils Alkohol. In beiden Studien Inokula (1000 & mgr; l) der Bakteriensuspension wurden für 1 Minute zentrifugiert bei ~ 13 000 Umdrehungen pro Minute. Die Testreagenzien (1000 ul) wurden dann zu dem Bakterienpellet, gevortext und alle Verdünnungen wurden 5 Minuten lang bei Raumtemperatur einstellen gelassen. Jeder wurde dann zentrifugiert, gefolgt von Reagenz Entfernung, MTSB Wäsche, Wirbel und schließlich zentrifugiert. Dies wurde dann wiederholt, wobei eine zweite Waschung mit MTSB Abschluss einer letzten Zentrifuge und schließlich Suspension in 1000 uL MTSB. Die endgültige Bioscreen Zubereitung in den Experimenten 1, 2, 3 und 4 bestand aus Aliquoten (200 mgr; l) der Bakterien in Kombination mit dem oralen Mundspülungen, AFC, CHX, Biotene & reg ;, destilliertes Wasser und TSB wird in Waben Brunnen (Abb. 2), die jeweils 90, 40, 25 und 45 Proben ergeben. Jede Teilmenge wurde fünfmal abgegeben wird, in verschiedenen Vertiefungen, die Homogenität und Reproduzierbarkeit zu gewährleisten. Mineralöl (0,1 ml) Tropfen wurden dann in jedes Well dispensiert Verdampfung zu verhindern. Die Waben Vertiefungen wurden dann mit einer Breitbandwellenlängenbereich von 420 nm bis 580 nm für 24 Stunden in den Bioscreen Microbiological Growth Analyzer platziert Änderungen der optischen Dichte zu überwachen. Wachstumskurven und Verdopplungszeit wurden dann berechnet RESULTSExperiment # 1: Das Wachstum von S. mutans wurde vollständig gehemmt bei 5% und 1% Konzentrationen von AFC und CHX (Figuren 3 & amp; 4).. Die Bakterien wurden getötet und keine signifikanten Änderungen in der optischen Dichte (OD) wurden festgestellt. Unter den gleichen Bedingungen, kam das Bakterienwachstum in allen anderen Verdünnungen (Figuren 5 & amp;. 6). Das bemerkenswerteste Wachstum ereignete sich in der 1% Biotene & reg; Verdünnung mit einem OD max = 1,383 und einer Verdopplungszeit (Td) = 1,4734 h. Dies wurde durch die 0,01% Biotene & reg gefolgt; Verdünnung mit einem OD max = 1.328 und ein Td = 1,3053 h. Die größte Verdopplungszeit betrug 0,01% CHX bei 2,1013 h. Die Verdünnungen der AFC und CHX Mundspülungen, die bei der Hemmung des Bakterienwachstums ineffektiv waren, hatten einen OD von etwa 1,3 nm, die auf die OD der Biotene & reg ähnlich war; und die Kontrollen Experiment # 2:. Generationsdauer und OD max waren ähnlich für alle Verdünnungen der verschiedenen Reagenzien. Das Wachstum begann für jede Verdünnung etwa zwei Stunden an. Es scheint jedoch einige Wachstumshemmung im Vergleich zu haben, um die anfängliche Inkubationsexperiment, die Reagenzien waren nicht wirksam, und Bakterien wuchsen noch (Abb. 7) Experiment #. 3: Die Kontrollen, H2O und TSB, nicht töten die Bakterien und auch nicht Biotene & reg; mit einer OD max und Generationszeit von 0,891 und 1,5516 h zugeführt. Kurzfristige Exposition von unverdünntem CHX vollständig gehemmt Wachstum von S. mutans. AFC für das Bakterienwachstum gehemmt SM sechs Stunden bei welcher Zeit es erschien Bakterienwachstum sein. Die OD max und Verdopplungszeit waren 1,288 und 1,1213 h zugeführt. Die OD max und Generationszeit für Biotene & reg; kurzzeitige Exposition von unverdünntem AFC und CHX das Wachstum von S. mutans inhibiert fünf Minuten: waren 0,891 und 1,5516 h zugeführt (Bild 8) Experiment # 4.. Das Bakterienwachstum kam es bei allen anderen Reagenzien und Verdünnungen von Alkohol mit der bemerkenswerteste Wachstum auftritt in unverdünnter Biotene & reg; (OD max = 1.629), gefolgt von 1% Ethanol (OD max = 1,598). Die größte Verdopplungszeit betrug 5% Ethanol bei 1.706 h (Fig.9). DISCUSSIONThe Beobachtungen und Ergebnisse in dieser Untersuchung legen nahe, dass alkoholfreie Chlorhexidin ist eine wirksame Mundspülung das Wachstum von S. mutans in der Unterdrückung . Das erste Experiment getestet, das Wachstum von Bakterien in Gegenwart von verschiedenen Verdünnungen (5%, 1%, 0,1%, 0,01%) der getesteten Reagenzien. Aus dem ersten Experiment wurde beobachtet, dass so wenig wie 1% AFC und CHX in der Hemmung des Wachstums der Bakterien wirksam waren. Biotene & reg; nicht Keimwachstum und die Ergebnisse der Kontrollen, destilliertes Wasser und MTSB hemmen, wie erwartet wurde, trat keine Tötung. der ersten Studie Im Anschluss an die zweite bestand aus dem Ergebnis des Aussetzens Bakterien auf 1% zu untersuchen und 5% Verdünnungen von antimikrobiellen Mundspülungen für 30 Minuten. Generationszeit und OD max waren ähnlich für beide Verdünnungen der verschiedenen Reagenzien. Darüber hinaus erschien es, um einige Wachstumshemmung wurden gegenüber der anfänglichen Inkubation Experiment wie das Wachstum der Bakterien verzögert wurde. Allerdings sind die Reagenzien waren nicht wirksam, und die S. mutans wuchs noch. Die Absicht für das dritte Experiment war eine klinische Situation zu simulieren. Die S. mutans wurden dem unverwässerten antimikrobiellen Mundspülungen, AFC, CHX, Biotene & reg ;, ausgesetzt und Wasser für 5 Minuten destilliert. Das unverwässerte alkoholhaltigen CHX hemmte das Wachstum von S. mutans. Im Gegensatz dazu hemmte der AFC Bakterienwachstum für 6 Stunden, wobei zu diesem Zeitpunkt erschien das Wachstum von Bakterien zu sein. An dieser Stelle Kontamination von anderen Mikrobiota in der AFC Mundspülung vermutet. Aus diesem Grund wurde das Experiment wiederholt. Darüber hinaus war auch nicht Alkohol eine verwirrende Variable bestimmt werden sollte. Diese vierte Studie zeigte, dass nach 5 Minuten Exposition gegenüber unverdünntem antimikrobielle Mundspülungen und verschiedenen Verdünnungen von Alkohol dort entweder in der AFC-Reagenz oder dem CHX Reagenz kein Bakterienwachstum war. Darüber hinaus haben die Alkohol Verdünnungen auf das Wachstum der S. mutans nicht hemmen Obwohl die letzte Studie zeigte, dass es keinen Unterschied in der Wirksamkeit zwischen dem AFC und Alkohol enthaltenden CHX, weitere Untersuchungen notwendig sind. (1) den Unterschied in der Formulierung und (2) die Mechanismen, wodurch die Hemmung der Bakterien zwischen dem AFC und Alkohol enthaltenden CHX zu bestimmen; und klinisch testen und bestätigen die Konsistenz der in dieser Studie dargestellten Ergebnisse. Aktuelle Daten deuten darauf hin, dass es nur eine klinische Studie zur Bewertung der Wirksamkeit von AFC in Bezug auf Plaque-Hemmung zu demonstrieren. Die Ergebnisse dieser Studie mit dieser konsistent waren Im Vergleich Yokoyama & rsquo; s. Studie (2009), Biotene & reg; bei der Hemmung des Wachstums von Aggregatibacter actinomycetemcomitans eine andere Bakterienspezies wirksam befunden wurde. Allerdings ist in diesem Forschungsprojekt war es unwirksam gegen S. mutans. Vielleicht ist Biotene wirksam gegen Bakterienarten, die in erster Linie subgingival anaeroben und gefunden sind. Ist dies der Fall war, kann man postulieren, dass Biotene besser als eine antibakterielle Mund spülen für Parodontitis serviert werden würde, während CHX Mundspülungen sollte in erster Linie für die Kariesprävention reserviert werden. CONCLUSION1) Alkoholfreie Chlorhexidin ist wirksam in das bakterielle Wachstum von S. mutans unterdrücken, und daher ist eine praktikable Alternative zu alkoholhaltigen Chlorhexidin. 2) Alkohol nicht auf die antimikrobiellen Eigenschaften von Chlorhexidine.OH Rebecca Cohen, DDS, Paed Cert, FRCD (C), Klasse von 2011; Faculty Advisor, Casey Chen, BDS, PhD, DDS Danksagung:. Dr. Casey Chen für seine Ermutigung und Jason Jee und Christine Hwang für ihre Hilfe und Unterstützung. Diese Forschungsarbeit wird in teilweise Erfüllung der Anforderungen für den Abschluss des Advanced Pediatric Dentistry-Programm an der Herman Ostrow School of Dentistry der USC eingereicht. REFERENCES1. Bolanowski SJ, Gescheider GA, Sutton SV. 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Das Wachstum von Mikroorganismen kann durch die Bioscreen C Automatische Wachstumskurve Analyse-System (Abb. 1) gemessen werden. Bioscreen C ist ein computergesteuertes Inkubator /Lese- /Shaker. Es verfügt über 8 Filter, die von 405 nm reichen ein Breitbandfilter auf 600 nm einschließlich und es wird ein Wabenmikro Änderungen der optischen Dichte gegen die Zeit zu messen, die mikrobiologische Wachstumskurven zu erzeugen.
Vier einzigartige Experimente wurden 0,12% alkoholfreies Chlorhexidin (AFC) durchgeführt, die Prüfung, 0,12% Chlorhexidingluconat (CHX) und Biotene & reg ;, oral Mund-Spülungen. Alle mikrobiellen Reagenzien wurden mit 0,22 mm Mikropore-Filter filtriert. Destilliertes Wasser wurde als negative Kontrolle, während ein steriles Kulturmedium, Trypticase-Sojabrühe (TSB), ergänzt mit Hefeextrakt verwendet wird, wurde als positive Kontrolle verwendet. S. mutans (SM GS5 Stamm) wurde kultiviert auf 1,5% Trypticase-Soja-Brühe mit 0,3% Hefeextrakt ergänzt, 0,75% Bacto-Agar und 2,5% hitzeinaktiviertes Pferdeserum und 24 Stunden lang bei 37 & deg; C. Frisch MTSB (900 uL) wurde mit den Bakterien inokuliert (100 uL) und die Suspensionen wurden auf die Test mikrobielle Mittel und destilliertes Wasser zugegeben.
beiträgt
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