Zusammenfassung
Hintergrund
Künstliche durch verschiedene Protokolle erzeugt Läsionen direkt die Antwort auf verschiedene reminalisierung Behandlungen beeinflussen könnten. Diese Studie verglich die Reaktion von verschiedenen künstlichen Karies ähnlichen Schmelzläsionen zu der häuslichen Pflege und professionelle Fluorid Basis-remineralisierende Behandlungen in situ
Methoden
Die getesteten Entmineralisierung Protokolle waren methylcellulose- MC Gel, Polyacrylsäure. - PA-Gel, Tetraethyl Methylen diphosphanate - TEMDP Lösung und Acetat- Pufferlösung. Die Läsionen wurden unter Verwendung eines in-situ
Modell remineralisiert, nach einem Crossover-und Doppel-Blind-Design. Zwölf Probanden trugen intraorale Geräte während drei Phasen (3 d jeweils): Kontrolle (C) (Speichel); Home-Care-F
- Behandlung (FD) (1100 ppm F - Zahnputzmittel, 2x1 min /Tag); und professionelle (FVD) (22.600 ppm F - Lack) und FD. Die de-Remineralisierung durch Quer Mikroradiographie-TMR und Härte (Oberflächenhärte /Querschnittshärte, SH /CSH, beziehungsweise) gemessen.
Ergebnisse
Für SH, von PA-Gel hergestellt Läsionen waren die einzige signifikante zeigt Unterschiede zwischen den remineralisierende Behandlungen (C x FD x FVD); während die TEMDP Läsion waren auf jede Fluoridbehandlung (für beide SH /CSH) nicht ansprechbar. Für TMR gab es keine Unterschiede zwischen den Behandlungen remineralisierende, unabhängig von der Art der Läsion. Im Allgemeinen waren die meisten reagieren Läsionen Fluorid die weniger entmineralisiertem Läsionen (unter Berücksichtigung der Härte: PA-Gel und Buffer)
Schlussfolgerungen
Die Art der Verletzung Einfluss auf die Oberfläche Remineralisierung Maße durch häusliche Pflege und professionelle Fluoridbehandlungen induziert. unter Verwendung dieser in situ
Modell.
Schlüsselwörter Demineralisation Enamel Fluorid in situ Studie Remineralisation hintergrund und Enamel Kariesläsion zunächst als oberflächen erweicht Entmineralisierung beginnt, zu einer unterirdischen Läsion im Laufe der Zeit fortschreitet, die klinisch ist gesehen als white-Spot-Läsionen [1]. In-vitro-
Protokolle sollten künstliche Läsionen so nahe wie möglich zu produzieren, können auf die in vivo
Zustand. Allerdings unterscheiden sich die künstlichen Läsionen durch verschiedene Laborprotokolle erzeugt deutlich in Bezug auf Mineralverteilung und Tiefe [2-6]. Diese Unterschiede sollten im Studiendesign berücksichtigt werden, da sie direkt die Antwort beeinflussen könnten weiter zu remineralisieren Behandlungen [2, 5, 7-9].
In einer früheren Studie, vier Protokolle künstliche Karies ähnlichen Schmelzläsionen zu produzieren ( methylcellulose- MC Gel; Polyacrylsäure - PA-Gel; Tetraethyl Methylen diphosphanate - TEMDP Lösung und Acetat - Pufferlösung) verglichen wurden, von denen TEMDP induziert den höchsten unterirdischen Mineralverlust und Tiefe [4]. Es gibt jedoch keine vergleichende Informationen über das Verhalten dieser Läsionen ist, wenn zur Remineralisierung unterzogen. Einige Werke
die Reaktion von verschiedenen Läsionen remineralisierende Wirkstoffe wie Fluorid sucht haben, haben sie jedoch eine oder zwei Arten von künstlichen karies getestet Läsionen, die Zeit der Entmineralisierung variierende anstatt Vergleich verschiedener Protokolle veröffentlicht demineralisierende [3, 5, 8, 9].
Lippert et al. [5] verglichen, um die Reaktion von zwei Arten von Läsionen, die mit verschiedenen Basismineralverteilungen (R) zu Fluorid (1,100 ppm F -) Behandlung in situ
. Low-R (Mineralverlust Durchschnitt) Läsionen weiter entmineralisiertes, während High-R Läsionen einige Remineralisierung ausgestellt. Dieser Befund unterstreicht die Bedeutung der Antwort von einem anderen Typ von Läsionen zu Remineralisierung des Studiums. Allerdings testeten die früheren Autoren nur die remineralisierende Wirkung von Fluoridzahnpaste. Es wäre interessant, die Reaktion der künstlichen Karies-Läsionen zu verschiedenen Remineralisierung Behandlungen zu wissen, man die Home-Care-Fluorid-Anwendung (wie Zahnputzmittel) und andere in Kombination mit professionellen Fluorid-Anwendung simuliert (wie Lack).
Transversal Mikroradiographie (TMR) und Querschnitt-Mikrohärte (CSH) sind nützliche Methoden de-Remineralisierung zu analysieren. Recent Vergleichsdaten aus TMR und CSH-Messungen zeigten, dass die Beziehung zwischen den Mineralgehalt und der Härte ist nicht für demineralisiertes Emaille linear, und diese Beziehung ist in hohem Maße abhängig von der Art der Läsion [4, 10]. Allerdings gibt es keine Informationen über die Beziehung zwischen den beiden Variablen auf demineralisiertem Schmelz zu verschiedenen reminalisierung Mitteln ausgesetzt.
Daher Ziel der Studie war zunächst die Reaktion der künstlichen Karies ähnlichen Schmelzläsionen von vier verschiedenen in vitro
Protokolle zur Remineralisierung durch Steuer Speichel induziert nur (C); Home-Care-F - Behandlung (Zahnputzmittel, FD); oder Berufs (Lack) und Home-Care-F - Behandlungen (FVD) in situ
. Die Studie auch zu prüfen soll, ob es eine Korrelation zwischen CSH und TMR-Daten sowohl für demineralisiertes und de-remineralisiert Emaille. Für diese Zwecke testeten die Nullhypothesen waren: 1) Es gibt keinen Unterschied zwischen den künstlichen Läsionen ungeachtet der remineralisierende Protokollen. 2) Es gibt keinen Unterschied zwischen den remineralisierende Protokolle unabhängig von der Art der künstlichen Läsion. 3) gibt es keine Korrelation zwischen CSH und TMR für demineralisiertem Schmelz. 4) gibt es keine Korrelation zwischen der CSH und TMR für de-remineralisiert Emaille.
Methoden
Ethische Aspekte und experimentelle in-situ-Design
ethische Genehmigung für die Studie, am Menschen, von der "Ethical gewährt wurde Ausschuss in Forschung Menschen "von Bauru School of Dentistry-Universität von São Paulo (Process n ° 036-2011) beteiligt sind. Schriftliche und unterzeichnete Einverständniserklärung wurde von allen Probanden erhalten vor Beginn der Studie.
Zwölf gesunde Erwachsene (18-30 Jahre alt) wurden nach der Studie Ein- und Ausschlusskriterien eingeschrieben [11]. Einschlusskriterien wurden wie folgt definiert: eine stimulierte physiologischen Speichelfließrate von & gt; 1 ml.min -1; physiologischen Speichelfließrate von & gt ein nicht-stimulierten, 0,25 ml.min -1; und eine gute Mundgesundheit (das heißt keine Hohlräume oder signifikante Gingivitis /Parodontitis). Ausschlusskriterien waren: systemische Krankheit; Schwangerschaft oder Stillzeit; Verwendung von festen oder herausnehmbaren kieferorthopädischen Geräten; Verwendung von Fluorid mouthrinse oder professionelle Fluoridanwendung in den letzten 2 Monaten. Eine Stichprobe von 12 Probanden wurde nach einem früheren als in situ
Studie zum Vergleich von Fluorid und Placebo Lacke auf Schmelzkaries Remineralisierung (% Oberflächenhärte Erholung,% SHR), α-Fehler von 5% und β-Fehlerebene unter Berücksichtigung von 20% [11].
diese prospektive, randomisierte, Crossover und doppelblind (der Autor PMAS und die Probanden) Studie wurde mit einer Auswaschung Intervall von 7 d vor jeder der drei experimentellen Phasen von 3 d Dauer durchgeführt [12]. Die experimentellen Behandlungen /Phasen waren wie folgt: Kontrolle (C) - Speichel Effekt nur (Placebo Zahnputzmittel); Home-Care (FD) (Fluorid Zahnputzmittel: 1.100 ppm F -, NaF); und professionelle (Lack: 22.600 ppm F -, NaF, vor der in situ
Studie) und Home-Care-Fluorid-Anwendungen (FVD). Die Probanden wurden zufällig in jeder experimentellen Phase zugeordnet.
Auf der ersten Phase dauerte vier Probanden teilweise auf die Behandlung C, vier auf die Behandlung FD und die anderen vier auf Behandlung FVD. In den anderen Phasen, die Schmelzproben und die Behandlungen wurden geändert, um eine echte Crossover-Design zu schaffen, bei dem alle Fächer für alle Behandlungen zufällig ausgesetzt waren.
Probenvorbereitung und Entsalzungsverfahren
Schmelzproben (4 mm X 4 mm x 2,5 mm, n = 288) wurden aus Rinder-Schneidezähne hergestellt, wie zuvor beschrieben [11]. Die polierten Proben wurden 4 demineralisierende Protokolle von geschichteten Randomisierung zugeteilt entsprechend ihrer Basisoberflächenhärte (SH) Mittel (n = 72): 1) MC-Gel; 2) PA-Gel; 3) TEMDP Lösung; und 4) Pufferlösung. Die Lösungen und Gele wurden nach Magalhães et al. [4] (Tabelle 1) .Tabelle 1 Beschreibung der demineralisierende Protokolle angewendet in vitro
Entsalzung *
pH
Periode
MC Gel
8% Methylcellulose-Gel-Schicht von 0,5 cm bei 4 ° C. Nach 12 h mit einem gleichen Volumen (1,5 ml) von 0,1 M Milchsäure bedeckt.
PH 4,6
14 Tage
PA Gel
20 g /L Carbopol 907 (PA, Molekulargewicht 450.000 Da), 500 mg /l Hydroxylapatit und 0,1 M Milchsäure.
pH 4,8
16 h
25 ml Gel /Probe
TEMDP Lösung
3 mM CaCl2 · 2H2O (LabSynth), 3 mM KH2PO4 (Sigma-Aldrich), 50 mM Milchsäure (Sigma- Aldrich), 6 uM TEMDP (Sigma-Aldrich); Spuren von Thymol.
pH 5,0
6 Tage
30 ml Lösung /Probe
.
Pufferlösung
1,28 mM Ca (NO3) 2 · 4H2O (Merck), 0,74 mM NaH2PO4 · 2H2O (LabSynth), 50 mM Eisessig und 0,03 ppm F (NaF).
pH 5,0
16 h
30 ml Lösung /Probe
Fußnote: * Alle Entmineralisierung Protokolle bei 37 ° C
Nagellack durchgeführt wurden, wurde am 1. äußeren Drittel der angewandten die Schmelzoberfläche (unbelichteten Bereich, Ton Schmelzoberfläche) und dann bei 37 ° C wurden die Proben einzeln in ungerührten sauren Lösungen oder Gele eingetaucht. Nach Entsalzung wurden die Proben gewaschen und getrocknet. Die andere äußere dritte Schmelzoberfläche wurde mit Nagellack (demineralisiertem Schmelzoberfläche) geschützt. Nach den Schmelz Härte Verlustwerte (% SHC - Oberflächenhärte ändern) wurden die Proben zunächst zufällig auf die
Phasen in situ zugewiesen (Remineralisierung Behandlungen), dann zu den Themen und zu den Orten in dem Gerät, von Excel Microsoft.
In-situ-Behandlungen
Vier Hohlräume 10 mm breit x 10 mm breit x 3 mm tief gemacht wurden, zwei auf jeder Seite (linke und rechte Seite) des Acryl-Gaumen-Gerät Remineralisierung. In jedem Hohlraum zwei Schmelzproben nach einem der demineralisierende Protokolle entsprechen, wurden mit Wachs fixiert. Für jede Phase wurde ein neues Gerät hergestellt, und die Proben wurden ersetzt. Die Proben wurden auf dem gleichen Niveau des Acryl gelegt, so wurde kein Biofilm Akkumulations erlaubt.
Während der 3-D-Phase wurde das Gerät nur in den Hauptmahlzeiten (4-mal pro Tag, maximal 1 h Dauer entfernt jeder, Intervall zwischen den Mahlzeiten von 2-3 h). Unmittelbar nach den Mahlzeiten, bevor Sie das Gerät in den Mund wieder einsetzen, wurden die Probanden geraten Mundhygiene durchführen Zahnputzmittel Verwendung nach der Behandlungsphase (Behandlung C: nicht fluoridiertes von IceFresh® oder Behandlungen FD und FVD: fluoridiertes Zahnputzmittel von Crest-Procter & amp;. Gamble®, Cincinnati, USA)
die Anwendung von Zahnputzmittel (alle Phasen) wurde für 1 min zweimal täglich beendet (nach dem ersten und letzten Mundhygiene des Tages) [5], durch Schlamm aus der Anwendung Zahnputzmittel (1: 3 Wasser, 1 Tropfen /Probe) an den Proben. Danach wurde das Gerät in den Mund wieder eingesetzt, und die Probanden wurden mit 10 ml Wasser für 5 s und dann zu spucken, zu spülen beraten.
In Bezug auf die professionelle Behandlung, der Lack (Duraphat, Colgate, São Bernardo do Campo, Brasilien) wurde vor der in situ
Studie angewendet, ein Mikrobrush verwenden. Danach wird bei 25 ° C in remineralisierende Lösung [13] gespeicherten Proben wurden. Nach 6 h wurden die Lacke entfernt [14], und die Proben wurden in das Gerät gestellt.
Die Themen für die korrekte Durchführung der Studie umfassend geschult wurden und waren auch nicht zu essen oder zu trinken, während die Geräte empfohlen im Mund und kein Fluorid oder /und Antiplaquemittel verwendet.
Oberflächen Knoop-Härte
Härtemessung an der Basislinie (SH Basislinie) gemessen wurde, nach Demineralisierung (SH Läsion) und am Ende des in situ
Remineralisierung (SH Finale), 100 & mgr; m voneinander entfernt, auf dem zentralen Bereich (5 Vertiefungen, 25 g, 10 s), mit einem Mikrohärteprüfer (Buehler Micromet 5114, Lake Bluff, USA). [- (SH Läsion * 100 /SH Basislinie)% SHC = 100] und der Prozentsatz der Oberflächenhärte Rückgewinnung (SHR) wurde nach Remineralisierung [% SHR = (SH endgültige berechnete Prozentsatz der Oberflächenhärte Änderung (SHC) wurde nach Entmineralisierung berechnet . - SH Läsion) /(SH Baseline-SH Läsion) X 100]
Danach wurden die Proben senkrecht zur Mittelband geschnitten und eine Hälfte pro Probe wurde analysiert unter Verwendung von Querschnittshärte (CSH); die andere Hälfte wurde für den Quer Mikroradiographie vorbereitet (TMR).
Die Probe in Acrylharz eingebettet wurde und poliert, wie zuvor beschrieben [11]. Drei Reihen von 8 Vertiefungen wurden jeweils auf der de-remineralisiert Schmelzbereich (CSH endgültig) gemacht, und zwei Reihen von 8 Vertiefungen wurden jeweils aus auf Ton und demineralisiertem Schmelz Bereiche (CSH Basislinie und CSH Läsion, beziehungsweise). Die Vertiefungen wurden bei 10, 30, 50, 70, 90, 110, 220, und 330 & mgr; m von der äußeren Emailoberfläche. Der Anteil der CSH Erholung (% CSHR) in jeder Tiefe wurde auch als getan für die Oberflächenhärte berechnet.
Quer Mikroradiographie
Die Hälfte der für TMR getrennt Probe wurde weiter geschnitten und von Hand poliert, ein Exemplar von einer ungefähren zu erhalten Dicke von 100 & mgr; m. Die Fragmente wurden in einem Probenhalter zusammen mit einem Aluminium-Kalibrierungsstufenkeil mit 11 Stufen festgelegt. mit einem Röntgengenerator (Softex, Tokyo, Japan) auf der Glasplatte wurde eine Mikroradiogramm bei 20 kV und 20 mA (in einem Abstand von 42 cm) für 20 min entnommen. Die Glasplatten wurden für 5 min entwickelt, in deionisiertem Wasser gespült, 3 min lang in einer dunklen Umgebung fixiert und dann in fließendem Wasser für 10 min und luftgetrocknet (alle Verfahren wurden bei 20 ° C durchgeführt) gespült. Die entwickelte Platte wurde mit einem Durchlichtmikroskop mit einem 20x-Objektiv (Zeiss, Deutschland), eine CCD-Kamera (Canon, Japan) und einem Computer ausgestattet analysiert. Zwei Bilder pro Probe wurden unter Verwendung von Datenerfassungs (Version 2012) aufgenommen und interpretiert Berechnung (Version 2006) Software von Inspektor Forschungssystem bv (Amsterdam, Niederlande).
Die Mineralgehalt wurde berechnet auf der Grundlage der Arbeit von Angmar et al. [15], die Dichte des Mineral vorausgesetzt werden 3,15 kg l -1 und 87 vol% des Mineralgehalts für den Schallschmelzes. Die Läsion Tiefe (LD), die integrierte Mineralverlust (& Delta; Z), die durchschnittliche Mineralverlust über die Läsion Tiefe (R) und die mittlere Dicke der "Pseudo-intakt" Oberflächenschicht (SL) wurden für die demineralisiertem (Läsion berechnet ) und de-remineralisiert (endgültige) Schmelz. Für den Vergleich zwischen den Remineralisierung Behandlungen wurden die Unterschiede wie folgt berechnet: ΔΔZ = & Delta; Z Läsion - & Delta; Z endgültig und ΔLD = LD Läsion - LD endgültig. Die% der & Delta; Z Rückgewinnung (% ΔZR) wurde auch & Delta; Z-Läsion als 100% berechnet unter Berücksichtigung.
Statistische Analyse
Daten statistisch die GraphPad Instat und GraphPad Prism verwendet für Windows (GraphPad Software, San Diego, USA) analysiert.
ANOVA mit Tukey-Test gefolgt wurden angewandt, um die demineralisierende Protokolle (CSH Läsion, & Delta; Z und LD) zu vergleichen. Für die Parameter% SHC, R und SL, kein parametrischer Kruskal-Wallis und die Post-hoc-Dunn-Tests wurden angewendet, da die Daten nicht Homogenität erreicht haben.
Um die Remineralisierung Behandlungen (% SHR% CSHR, ΔΔZ vergleichen , ΔLD und% ΔZR Werte), zwei-Wege-ANOVA mit wiederholten Messungen durch den Bonferroni gefolgt Test angewandt wurden, als Faktoren berücksichtigt:. Art der Verletzung und Behandlung Remineralisierung
Um das zweite Ziel der Studie, die Daten von CSH erreichen und TMR (% Mineralgehalt) bei 10, 30, 50, 70, 90, 110, 220, und 330 & mgr; m von der äußeren Schmelzoberfläche wurden lineare Regressions vorgelegt (Statistica, Statsoft, Tulsa, USA). Die Anzahl der Themen wurde als Stichprobengröße und dem Signifikanzniveau für alle Tests angenommen wurde auf 5% festgelegt.
Ergebnisse
