Zusammenfassung
Hintergrund
die Isolationsfrequenz und die Anfälligkeit für Antipilzmittel von orale Candida
von Patienten mit oraler Candidiasis-Isolaten (OC) wurden durchgeführt, in den Jahren 2006-2007 und 2012-2013 zwischen den Studien verglichen.
Methoden TÜV total158 Stämme von 112 Patienten isoliert wurde, die für das Kagoshima University Hospital besucht Behandlung von OC während der 14-Monats-Zeitraum ab Februar 2012 und März 2013 und von jedem Stamm und die Anfälligkeit gegen Antimykotika
Candida auf der Isolationsfrequenz bewertet, wie denen in den Jahren 2006-2007 ausgewertet verglichen.
Ergebnisse
Es gab eine höhere Frequenz von Xerostomie als Hauptbeschwerde und einer Autoimmunerkrankung in der 2012-2013 Studie als in der 2006-2007 Studie. Mehr als 95% der Candida
Isolate waren C. albicans
und C. glabrata
. Darüber hinaus ist der Anteil des letzteren von 12,3% in 2006-2007 Studie auf 23,4% in der Studie von 2012 bis 2013 erhöht, während der Anteil des ersteren von 86,2% auf 72,8% erniedrigt. C. albicans
bei fast allen Patienten isoliert wurde, während C. glabrata
wurde nur gleichzeitig mit C. albicans
isoliert. Minimale Hemmkonzentrationen (MICs) wurden keine signifikanten Unterschiede zwischen den Gruppen mit einigen Ausnahmen. Candida
Isolate, von denen MHK Punkte übertroffen brechen, erhöht offenbar für Miconazol und Itraconazol gegen C. glabrata
in der 2012-2013 Studie, aber dies war statistisch nicht signifikant. Als Ergebnis mehr Fälle von Autoimmunkrankheit, eine größere Anzahl von C. glabrata
Isolate und eine höhere Beständigkeit gegen Azole wurden in der Studie 2012-2013 gesehen als in der Studie 2006-2007.
Schlussfolgerung
Diese Daten zeigen, dass mit den jüngsten Anstieg in C. glabrata
Infektion, einer ursächlichen Pilz OC und in C. glabrata
Beständigkeit Azole, Vorsicht bei der Auswahl von Antimykotika zur Behandlung von OC erforderlich ist.
Schlüsselwörter Candida glabrata
Candida albicans
klinisch isolierten Stämmen Minimale Hemmkonzentration Resistente Stämme Yoshiaki Kamikawa, Youichirou Mori trugen gleichermaßen zu dieser Arbeit. | Elektronische Zusatzmaterial
Die Online-Version dieses Artikels (doi:. 10 1186 /1472-6831-14-14). enthält Zusatzmaterial, das autorisierten Benutzern zur Verfügung
Hintergrund
In den frühen 1990er Jahren, Candida albicans
resistent gegen Fluconazol berichtet wurde häufig isoliert aus der Mundhöhle des erworbenen Immunschwäche-Syndrom-Patienten zu werden. Eine epidemiologische Studie wurde über die Empfindlichkeit durchgeführt Drogen von Candida
Stämmen von Patienten mit invasiver Candidiasis [1] isoliert auf antimykotische. Globale Überwachungsprogramme wurden für den Umgang mit Candida-Resistenz gegen Antimykotika, wie die Sentry-Programm auf Pilze resistent gegen Amphotericin B in den Jahren 2006-2007 [2] und Berichte über Soor Anfälligkeit umgesetzt Candín-Typ Antimykotika [3-6]. Es gibt zwei Berichte über die Hausüberwachung in Japan: Überwachung 99 durch die Japan Invasive Mykosen Surveillance Study Group (JMS) [7] und Bericht von Japan Antimykotische Surveillance Program (JASP) [8-10]. Allerdings konzentriert sich diese Überwachungsprogramme auf von klinischen Fällen tiefsitzender Mykosen isolierten Stämme, und nur 1 Bericht unserer früheren Studie in den Jahren 2006-2007 durchgeführt wurde auf orale Candidiasis durchgeführt [11]. Die Isolationsfrequenz von Candida
Stämme ist wahrscheinlich im Laufe der Zeit ändern, wie die Vergleiche früherer Studien in verschiedenen Zeitabschnitten durchgeführt gezeigt. Zum Beispiel, C. glabrata
wurde selten von AIDS-Patienten mit orale Candidiasis (OC) oder Pilzinfektionen der Speiseröhre in Sudo Studie im Jahr 1997 veröffentlicht [12] isoliert; im Gegensatz, C. glabrata
wurde in 12,3% der Patienten mit OC in unserer Studie, in der Itraconazol (ITCZ) wirksam war trotz der Existenz von resistenten C. glabrata
gegen ITCZ [11] nachgewiesen. Darüber hinaus, während beständig C. glabrata
gegen ITCZ mit hohen Frequenzen von 50% auftrat und 72,7% an der OC und nicht-OC Patienten dieser Studie jeweils [11], eine frühere japanische Überwachung Studie zeigte beständig C. glabrata Hotels in nur 1,0 bis 9,3% der Patienten mit Mycosis, vor allem tief verwurzelte Mykose [7-10]. Somit ändert sich die Isolationsfrequenz von Candida
Arten und deren resistente Stämme im Laufe der Zeit, aber keine Studie hat Variationen in der Häufigkeit von OC im Laufe der Zeit in der gleichen Gesundheitseinrichtung gemeldet.
Die vorliegende Studie wurde durchgeführt, Antimykotika zu bewerten gegen Candida
Stämme isoliert Form der Mundhöhle von OC Patienten, die Kagoshima University Hospital in 2012-2013 (14 Monate) besucht und die Isolationsfrequenz von Candida
Arten und ihre resistenten Stämmen im Vergleich zu unseren früheren Studie zur Beurteilung durchgeführt, in 2006-2007 (24 Monate), um die Verwendung antimykotische Medikamente in der Behandlung von OC.
Methoden
Themen
Diese Studie analysierte 158 isolierten Stämmen von 112 Patienten untersuchen, die die Abteilung für Oralchirurgie besuchte, Kagoshima Universität Krankenhaus, für die Behandlung von OC während der 14-Monats-Zeitraum von Februar 2012 bis März 2013 Stämme von Patienten gesammelt innerhalb von 3 Monaten antimykotische medikamentöse Therapie erhalten hat aus der Sammlung von dieser Studie ausgeschlossen wurden.
Analyse von Hintergrundvariablen von Candida
-isolated Patienten
Eine Analyse wurde für das Alter durchgeführt, Geschlecht, zugrunde liegende systemische Erkrankung, Steroidhormon-Gebrauch, Gebiss Gebrauch, Hauptbeschwerden und Erkrankungen der Mundhöhle in den 112 Patienten, von denen Candida
isoliert wurde.
Sammlung von Candida
aus der Mundhöhle und Bakterienkultur
vor der Diagnose von OC, der betroffene Bereich der Mundhöhle wurde mit einem sterilen Baumwolltupfer abgewischt vorgeeingetaucht in steriler physiologischer Kochsalzlösung. Flüssigkeitsprobe auf dem Tupfer gesammelt wurde verschmiert auf eine CHROMagar Candida
Kulturmedium (Nippon Becton Dickinson und Company, Ltd.) und inkubiert 48 Stunden bei 36 ° C.
Identifizierung von Candida
Spezies
Positive Kultur von Candida
Spezies wurde durch farbmetrische Beobachtung der Kolonien in der CHROMagar Candida
Kulturmedium, das synthetische kolorimetrische Substrate, die durch Enzyme in Candida
Spezies enthalten chromogenen sein geändert bestimmt. Bestätigung der Bestimmung von Candida-Spezies wurde dann durch PCR durchgeführt basierend auf dem Verfahren von Kanbe et al., Kurz Pilzzellen in der CHROMagar Candida Kulturmedium gezüchtet, durch Zentrifugation geerntet, dreimal mit destilliertem Wasser, und die DNAs wurden extrahiert und gereinigt gemäß dem Protokoll eines DNA-Reinigungs-Kits, Fast DNA Kit (BP Biomedical, US). Dann wurden die DNA-Proben durch PCR amplifiziert und die PCR-Produkte mittels Agarose-Gelelektrophorese analysiert wurden, die Art von Candida-Arten zu bestimmen [13].
Diagnosis of OC
Flüssigkeit auf dem Tupfer aus dem betroffenen Gebiet gesammelt transferiert auf einen Glasträger für Gram-Färbung durch ein Routineverfahren. Eine Diagnose der OC gemacht wurde, als Koloniebildung während der Inkubation und die Anwesenheit von Pseudo Mycel wurde durch Gram-Färbung gezeigt [14].
Bewertung der Anfälligkeit für Antimykotika
Candida
Stämme nachgewiesen durch die oben festgestellt wurde, genannten Verfahren wurden wieder ausgesät auf Sabouraud-Agar-Medium (Nippon Becton und Dickinson Company, Ltd.), bei 36 ° C von 48 Stunden inkubiert. Dann wurde die Kultur verdünnt und auf einen McFarland Faktor von 0,5 durch die optische Dichte bei 530 nm gemessen wurde ein Spektrophotometer ViSpec II (Kyokuto, Japan) verwendet und für den Assay angewendet, um die Empfindlichkeit zu bestimmen. Eine minimale Hemmkonzentration (MIC) von jedem der AMPH-B, 5-FC, FLCZ, MCZ, ITCZ und MCFG gegen diese Candida
Stämme wurden mit einem Hefe-wie Pilz-Empfindlichkeit Kit ASTY (Kyokuto Pharmaceutical) kompatibel bestimmt mit das Nationale Komitee für Clinical Laboratory Standards (NCCLS) M-27A-Methode [15]. Das Kit enthält 11 Konzentrationen jedes Antimykotikum in einer Mikrotiterplatte mit 96 Vertiefungen, dh Endkonzentrationen 0, 0,03, 0,06, 0,125, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8 und 16 & mgr; g /ml für Amphotericin B, Miconazol, und Micafungin, 0, 0,125, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 16, 32, 64 & mgr; g /ml für Fluconazol und 5-FC und 0, 0,015, 0,03, 0,06, 0,125, 0,25, 0,5, 1 , 2, 4 und 8 ug /ml für Itraconazol und Micafungin. Die Konzentration "0 pg /mL" als Kontrolle angesehen. Stämme mit hoher MIC wurden erneut Messung von MIC mit einem Hefe-wie Pilz-DP Eiken (Eiken Chemical) kompatibel mit dem Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) M27-A3-Verfahren unterzogen [10, 16]. MIC50 und MIC90 erforderlich MICs das Wachstum von jeweils 50% und 90% der Candida
Spezies zu hemmen, wurden berechnet. Resistente Stämme wurden durch die folgenden MIC Kriterien bestimmt: AMPH-B, FLCZ, ≥64 & mgr; g /ml; 5-FC, ≥32 & mgr; g /ml; MCZ, ≥4 g /ml; MCFG, & gt; 2 & mgr; g /ml; und ITCZ, ≥1 pg /mL.
Einwilligung nach Aufklärung und ethische Leitlinie für alle teilnehmenden Patienten eine schriftliche Einverständniserklärung über die Bereitstellung direkt mündliche und schriftliche detaillierte Erklärung dieser Untersuchung. Diese Studie wurde von der Human Ethikkommission der Kagoshima University Medical and Dental Hospital (No.23-18 und 23-27) zugelassen.
Die statistische Analyse
Fisher-Wahrscheinlichkeitstest, um zu bestimmen Unterschiede in Geschlecht eingesetzt wurde (2 × 2), Hauptbeschwerden (2 × 8), systemische Erkrankung (ja oder nein; 2 × 2), Steroide (2 × 2), die Anwesenheit von Zahnersatz (2 × 2), orale Candidiasis (2 × 4), Zusammensetzung von isolierten Candida
Spezies (2 × 7), und das Auftreten von resistenten Stämmen zwischen 2006-2007 Studie und 2012-2013 Studie. Der Altersunterschied zwischen den zwei Studien wurde von Student t geprüft
-test. P-Wert von weniger als 0,05 wurde als statistisch signifikant angesehen.
Ergebnisse
Hintergrund Variablen
Wie in 1 Tabelle gezeigt, da in Bezug auf Geschlecht, Alter, Verwendung von Steroidhormonbehandlung keine statistischen Unterschiede in Hintergrundvariablen waren, Präsenz und die Art von systemischen Erkrankungen und das Vorhandensein von Zahnersatz zwischen Patienten in der Studie 2006-2007 und die der 2012-2013 Studie. Bei den Patienten mit 1 Hauptbeschwerde war Xerostomie höher in der 2012-2013 Studie (23,2%) als in der 2006-2007 Studie (8,8%), während Tylosis linguae bei 7,0% niedriger war und 0% betragen. Zusammengefasst war die Zusammensetzung der wichtigsten Beschwerden signifikant unterschiedlich zwischen den 2006-2007 Patienten und 2012-2013 Patienten, wie durch Fisher-Wahrscheinlichkeitstest (p & lt; 0,05) analysiert. Obwohl kein signifikanter Unterschied im Auftreten von systemischen Erkrankung zwischen den 2-Studien (77,2% vs. 86,6%), war die Anwesenheit von Autoimmunerkrankungen höher in der Studie von 2012 bis 2013 als in 2006-2007 Studie (27,6% vs. 6,7% , respectively) .Tabelle 1 Hintergrund Variablen der Patienten mit oralen immatrikuliert Candidiasis in der 2006-2007 und 2012-2013 Studien
2006-2007
2012-2013
Test
Themen number
Total
57
112
Gender
Male
19
(33.3)
30
(26.8)
Fisher’s genaue Wahrscheinlichkeitstest
Weiblich
38
(66,7)
82
(73,2)
[2 × 2]
NS
Alter
Durchschnitt [max-min]
67,9
[26 -90]
69,6
[21-97]
Student-t-Test
NS
Hauptbeschwerden
Hitzegefühl (HS) auf
23
(40,4)
46
(41.1)
Geschmack Anomalie (TA)
2
(3.5)
0
(0)
Xerostomie (X)
5
(8,8)
26
(23,2)
Tylosis linguae (TL)
4
(7.0)
0
(0)
Fisher-Wahrscheinlichkeitstest
Rubor /Erosion (R /E)
4
(7.0)
8
(7.1)
[2 × 8]
HS + TA + X
9
(15.8)
16
(14.3)
p & lt; 0,05
HS + TA + R /E
5
(8,8)
8
(7.1)
HS + TL
5
(8.8)
8
(7.1)
Total
57
(100)
112
(100)
Systemic Krankheit
Ja
44
(77,2)
97
(86,6)
Fisher-Wahrscheinlichkeitstest
Keine
13
(28,8)
15
(13.4)
[2 × 2]
Total
57
(100)
112
(100)
N.S.
Endocrine
22
(29.3)
22
(17.3)
Cardiovascular
18
(24.0)
28
(22.0)
Gastrointestinal
123
(16.0)
12
(9.4)
Fisher’s genaue Wahrscheinlichkeitstest
Bösartiger Tumor
8
(10.7)
12
(9.4)
[2 × 7]
CNS
4
(5.3)
10
(7.9)
N.S.
Viral
6
(8.0)
8
(6.3)
Autoimmune
5
(6.7)
35
(27.6)
Total
75
(100)
127
(100)
Steroid
Dose
12
(21.1)
28
(25.0)
Fisher’s genaue Wahrscheinlichkeitstest
Nicht dosierte
45
(78,9)
84
(75,0)
[2 × 2]
Total
57
(100)
112
(100)
N.S.
Denture
Wearer
37
(64.9)
57
(50.9)
Fisher’s genaue Wahrscheinlichkeitstest
Nicht Träger
20
(35.1)
55
(49,1)
[2 × 2]
insgesamt
75
(100)
112
(100)
NS
Mundcandidiasis
Pseudomembranöse
42
(73,7)
42
(37.5)
Erythematöser
11
(19.3)
52
( 46.4)
Fisher-Wahrscheinlichkeitstest
hypertrophe
2
(3.5)
4
(3.6)
[2 × 2]
Mixed
2
(3.5)
14
(12.5)
N.S.
Total
55
(100)
112
(100)
Zahl in Klammern stellt den Prozentsatz außer dem Alter.
Classification oraler Candidiasis (OC)
Classification der diagnostizierten Fälle OC ist ebenfalls in Tabelle 1 Unter den 57 Patienten in der Studie von 2006 bis 2007 gezeigt, war OC am häufigsten klassifiziert als pseudomembranöse OC (73,7%), gefolgt von gerötete OC gefolgt (19,3%). Im 2012-2013 Studie entfielen jedoch gerötete OC für die Hälfte (46,4%) von OC Fälle, gefolgt von pseudomembranösen OC (37,5%) und gemischte OC (gerötete und pseudomembranöse, 12,5%), aber kein statistisch signifikanter Unterschied festgestellt.
isoliert Candida
Spezies
insgesamt 158 Stämme von Candida
Patienten in der Studie von 2012 bis 2013 getrennt wurden. Die am häufigsten isolierten Candida
Arten waren Candida albicans
(C. albicans
, 116 Stämme, 73,4%), gefolgt von C. glabrata
(36 Stämme, 22,8%), C. tropicalis
(3 Stämme, 1,9%), C. parapsilosis
(2 Stämme, 1,3%) und C. krusei
(1-Stamm, 0,6%) (Tabelle 2). Wenn bei einem Patienten Basis analysiert, C. albicans
bei allen Patienten isoliert wurde (n = 112), während C. glabrata
wurde nie nur begleitend
bei 36 Patienten mit C. albicans auf seine eigene, gefunden . Mehr als eine Art von Candida
Spezies wurde bei 41 Patienten isoliert, mit begleitender C. albicans
und C. glabrata
die häufigste Kombination dieser Patienten in etwa 90%. Im Gegensatz dazu unter 65 Stämmen von Candida
in Patienten in der Studie von 2006 bis 2007 isoliert, 56 Stämme von C. albicans
(86,2%), 8 Stämme von C. glabrata
(12,3%) und 1-Stamm von C. tropicalis
(1,5%) wurden identifiziert, und es werden keine Stämme von C. parapsilosis und C. krusei
nachgewiesen. So wird in der 2012-2013 Studie, die Anzahl der isolierten Stämme von C. glabrata
war fast doppelt so hoch der 2006-2007 Studie, und das Verhältnis von C. albicans
zu allen Candida
Stämme wurde deshalb signifikant niedriger in der 2012-2013 Studie, wenn sie auf einem Stamm-Basis oder auf einem Patienten-Basis analysiert. .Tabelle 2 Verteilung von Candida-Spezies isoliert von Patienten mit oraler Candidiasis bei, also in beiden Patientenbasis und Stamm-Basis analysiert, ein statistisch signifikanter Unterschied wurde zwischen 2006-2007 Studium und 2012-2013 Studie (0,01 p & lt) beobachtet die 2006-2007 und 2012-2013 Studien
Candida-Spezies
Anzahl der Patienten (%)
Test-
2006-2007
2012-2013
Einzelne Arten isoliert
Candida albicans
(CA )
49
(86,0)
71
(63,4)
Candida glabrata
(CG)
1
(1.8)
0
(0)
Candida tropicalis
( CT)
0
(0)
0
(0)
Candida parapsilosis
(CP
)
0
(0)
0
(0)
Candida krusei
(CK)
0
(0)
0
(0)
Fisher-Wahrscheinlichkeitstest
Plural Spezies isoliert
[2 × 10]
CA + CG
6
(10.5)
36
(32.1)
p & lt; 0,01
CA + CT
0
(0)
3
(2.7)
CA + CP
0
(0)
1
(0,9)
CA + CG + CT
1
(1.8)
0
(0)
CA + CP + CK
0
(0)
1
(0.9)
Total
57
(100)
112
(100)
Candida-Spezies
Gesamtzahl der Candida
Stämme isoliert (%)
Test-
2006-2007
2012-2013
Candida albicans
56
(86,2)
112
(72,8)
Candida glabrata
8
(12.3) auf
36
(23,4)
Candida tropicalis
1
(1.5)
3
(1.9)
Fishers exaktem Wahrscheinlichkeitstest
Candida parapsilosis
0
(0)
2
(1.3)
[2 × 5]
Candida krusei
0
(0)
1 |
(0,6)
p & lt; 0,01
Gesamt
65
(100)
154
(100
die Empfindlichkeit gegenüber Antimykotika
wenige Da (1 bis 3 Stämme) der anderen Spezies
Candida als C. albicans
und C. glabrata
in beiden Studien isoliert wurden, gegen MHK-Werte von Antimykotika C. tropicalis
, C. parapsilosis, Poster und C. krusei
, die allein nie isoliert, sondern nur in Kombination mit C. albicans
und C. glabrata
, waren nicht zuverlässig. daher beziehen sich die Ergebnisse der Empfindlichkeitstests vor allem auf die MICs von C. albicans und C. glabrata
(Tabelle 3) .Tabelle 3 Antimykotische Empfindlichkeitsprofil, gegen Amphotericin B, Flucytosin, Fluconazol, Miconazol, Itraconazol, und Micafungin, von Candida-Spezies isoliert von Patienten mit oraler Candidiasis in der 2006-2007 und 2012-2013 Studien
ein. Amphotericin B (AMPH-B)
Jahr
Stamm
No. von Stämmen
MIC (μg/mL)
MIC50
MIC90
<0.03
0.03
0.06
0.125
0.25
0.5
1
2
4
8
16
>16
2006-2007
C. albicans
56
8
43
3
2
0,5
0,5
C. glabrata
8
1 2
2 2
1
0,5
2
C. tropicalis
1
1 |
0,25
0,25
2012-2013
C. albicans
112
4
12
86
9
1
0,5
1
C. glabrata
36
1 of 2
16
14
2
1
0,5
1
C. tropicalis
3
1 | 2
1
1
C. parapsilosis
2
2
& lt; 0,03
& lt; 0,03
C. krusei
1
1
0,5
0,5
b. Flucytosin (5-FC)
Jahr
Stamm
Anzahl der Stämme Bei
MIC
(ug /ml)
MIC 50
MIC 90
& lt; 0,125
0,125
0,25
0,5
1
2
4
8
16
32
64
& gt ; 64
2006-2007
C. albicans
56
18
8
24
3
1
2
0,25
0,5
C. glabrata
8
4
1
1 |
2
& lt; 0,125
16
C. tropicalis
1
1
0,125
0,125
2012-2013
C. albicans
112
56
1
43
3
3
4
1
1
0,25
1
C. glabrata
36
20
6
6
2
1
1
& lt; 0,125
8
C. tropicalis
3
3
& lt; 0,125
& lt; 0,125
C. parapsilosis
2
2
2
C. krusei
1
1
1 |
0,25
0,25
c. Fluconazol (FLCZ)
Jahr
Stamm
Anzahl der Stämme Bei
MIC
(ug /ml)
MIC 50
MIC 90
& lt; 0,125
0,125
0,25
0,5
1
2
4
8
16
32
64
& gt; 64
2006-2007
C. albicans
56
22
22
5
1
1
1
1
3
0,5
4
C. glabrata
8
1
2
2
1
1
1 |
2
& gt; 64
C. tropicalis
1 |
1
& gt; 64
& gt; 64
2012-2013
C. albicans
112
4
33
51
2
1
3
3
3
0.5
2
C. glabrata
36
4
1
5
6
7
7
2
16
64
C. tropicalis
3
1
2
32
32
C. parapsilosis
2
2
2
2
C. krusei
1
1
2
2
d. Miconazol (MCZ)
Jahr
Stamm
Anzahl der Stämme Bei
MIC
(ug /ml)
MIC 50
MIC 90
& lt; 0,03
0,03
0,06
0,125
0,25
0,5
1
2
4
8
16
& gt; 16
2006-2007
C. albicans
56
2
22
20
8
1
3
0,125
0,25
C. glabrata
8
1
2
2
1
2
1
4
C. tropicalis
1
0,125
0,125
2012-2013
C. albicans
112
2
20
64
18
1
1
1
2
3
0,25
0,5
C. glabrata
36
1
5
12
7
3
3
2
3
2
16
C . tropicalis
3
1
1
1 |
1
4
C. parapsilosis
2
1
1
1-2
2
C. kurusei
1
1
4
4
e. Itraconazol (ITCZ)
Jahr
Stamm
Anzahl der Stämme Bei
MIC
(ug /ml)
MIC
