HINTERGRUND
Die Blutplättchen sind kleine kernlose granulierte Körper, die, zu aggregieren und bilden einen Blutplättchenpfropfen an den Stellen der Gefäßverletzung haften Blutverlust zu verhindern. Platelet-Konzentration im Blut beträgt etwa 300.000 /ul, und sie haben in der Regel eine Halbwertszeit von 4 Tagen. Sie werden von engagierten Riesen Stammzellen gebildet genannt Megakaryozyten, wie sie Bits von ihrem Zytoplasma abschnüren und extrudieren sie in den Blutkreislauf. Plättchen haben Mikrotubuli an ihrem Umfang und eine weitgehend stülpt Membran in Kontakt mit der extrazellulären Flüssigkeit.
ihren Membranen enthalten Rezeptoren für eine Reihe von Substanzen, einschließlich Kollagen, Adenosindiphosphat (ADP), von Willebrand Faktor und Fibrinogen. Einige der Inhalt ihres Zytoplasmas haben ihren Ursprung in den Megakaryozyten, einige intern synthetisiert werden, und einige sind nach der Endozytose gespeichert. Unter den intrazellulären Organellen sind zwei Arten von Granulat:
1) Dense Granulate, die die Nicht-Protein-Substanzen enthalten, die in Reaktion auf die Blutplättchen-Aktivierung sezerniert werden, einschließlich Serotonin, ADP /ATP, Histamin, Dopamin und catecholamines.1
2) * -granules, die unter diesen gespeicherten Proteine sind mitogene und angiogene Wachstumsfaktoren proteins.1-3 sezerniert enthalten, die für harte und weiche Geweberegeneration und Reparatur wesentlich sind. Marx4 von Nordamerika und Anitua et AL1 von Europa haben gezeigt, dass frühere und höhere Knochendichte in Operationsstellen mit PRP behandelt erhalten wird, als an Kontrollstellen verglichen. Die Wachstumsfaktoren der Thrombozyten sind platelet-derived growth factor (PDGF), transformierender Wachstumsfaktor (TGF-), vascular endothelial growth factor (VEGF), basischer Fibroblasten-Wachstumsfaktor (bFGF), von Blutplättchen abgeleiteter epidermalen Wachstumsfaktor (PDEGF) und Insulin -artigen Wachstumsfaktor-1 (IGF-1). Diese sind auf verschiedene Weise bei der Stimulierung der Chemotaxis, Zellproliferation und Reifung in der Wund healing.1
beteiligt
In der Thrombozyten frühen 1990er Jahren reichem Plasma (PRP) wurde als autologe biomaterial.5,6 eingeführt Eine Vielzahl von Maschinen zugeschnitten sind die optimale zentrifugalen Trennung von PRP für die therapeutische Verwendung von kleinen Mengen von citriertem blood.7-13
2002 Gonshor9 ein Verfahren entwickelt, durch eine Doppelspin Zentrifugationsverfahren unter Verwendung einer nicht automatisierten Zentrifugen gekennzeichnet erreichen zu sequestrieren und konzentrieren Blutplättchen auf ein Niveau vier- bis achtmal Basis ganze Blutwerte. Die Technik hergestellt Konzentrationen von PDGF-AB oberhalb von 500% und TGF, mehr als 800%. Seine Tests zeigten, dass die 85,1% Plättchenausbeute blieb ruhig während des gesamten Verfahrens, die Aufrechterhaltung ihrer Integrität und Lebensfähigkeit, ohne eine unbeabsichtigte Aktivierung. Bovine Thrombin 5000 Einheiten und 10% Calciumchlorid-Lösung wurden für die Plättchenaktivierung verwendet wird, eine PRP-Gel zu schaffen.
Im Jahr 2005 Marx und Garg15 ein ausgezeichnetes Lehrbuch veröffentlicht auf "Dental und Craniofacial Anwendungen von Platelet-Rich Plasma". In diesem Text die Autoren, dass Heilige Gral "auf die Wundheilung" "Wachstumsfaktoren wie die entstanden sind", und sie projiziert für gefriergetrocknete Rinder Thrombin-Zubereitung als Standardgerinnung von PRP Initiierung und Aktivierung Blutplättchen.
Doch ein Jahr zuvor in 2004 wurde Rinder-Thrombin in Kanada nicht zur Verfügung. Dieses Ereignis löste eine Suche nach einer Alternative zu Rinder-Thrombin. Autologe Thrombin und /oder rekombinantes humanes Thrombin wurden die logische Wahl. Die Notwendigkeit wurde daher die Mutter der Erfindung und eine Suche wurde nach einer Alternative ins Leben gerufen.
THEMEN
Diese Studie von 21 Patienten bestand die Implantationen erforderlich und /oder Knochentransplantation. Von den 21 Patienten benötigten 5 Platzierung Sofortimplantat mit Knochentransplantation, 8 Platzierung benötigt Implantat nur und 8 benötigt Knochen nur Pfropfen.
Material und Methoden
Werkstoffe
1) Allzweck-Zentrifuge (nicht automatisierte) mit einem sechs~~POS=TRUNC-Position Rotor oder automatisierte Zentrifuge.
2) 4 -10ml gelb-Top-Vacutainer haltige Säure-Citrat-Dextrose (ACD-A) Lösung.
3) 6 -10-ml noncoagulant rot-top Vacutainer
4) 21 -.. Messer Schmetterlingsnadel und 19 Gauge butterfly-Nadel
5) 21/2 "(63mm) stumpfe Nadel .
6) 3 "(76 mm) stumpfe Nadel.
7) 10% Calciumchlorid-Lösung.
8) 6- 5 ml sterile Spritzen.
9). 6 -.. 1 ml sterile Spritzen
10) Sterilbehälter für PRP
11) Sterilcontainer für PPP
12) Sterilcontainer für Serum 13) 4 sterile dappen Gerichte. 14) Verpackung von sterilen Kollagenmembran. (Colla Band oder Neo Tape) 15) Reagenzglasständer. Blutentnahme und Verarbeitung Röhrchen Blut aus der antecubital Region genommen wurden mit einer 21-Gauge oder 19 Gauge Schmetterlingsnadel und gesammelt in 4-10ml gelb-Top-Blutsammelröhrchen, die Säure-Citrat-Dextrose (ACD-A) Lösung. Zwei zusätzliche Röhrchen Blut wurden wie beschrieben gesammelt oben, außer in 10ml rot-Top-Vacutainer ohne Antikoagulans. (Jede der beiden roten Oberrohr wurde mit einem X markiert) (Fig. 1). Die vier gelb-Röhrchen mit Blut wurden verarbeitet PRP herzustellen unter Verwendung des Gonshor Procedure9 (Abb. 2-4). Die zwei redtop Röhrchen Blut wurden beiseite zu gerinnen setzen. Mit der Universal-Zentrifuge in Gonshor Publikation beschrieben, 9 werden die zwei rot-Top-Rohre mit geronnenem Blut wurden zusammen für 10 Minuten bei 2000 Umdrehungen pro Minute zentrifugiert mit den vier roten Top-Röhren mit Plasma für das zweite Spin (Abb. 3). Das Serum wurde vorsichtig aus jedem Röhrchen mit einer sterilen Spritze entfernt und gepoolt, in einen sterilen Behälter (Fig. 5). Die Behälter PRP (4.5mls) enthält, PPP (6.5mls) und Serum (2,5 ml) wurden in der chirurgischen operatory zusammen mit einem Fläschchen mit 10% Calciumchlorid, sterile dappen Geschirr, 5ml und 1 ml sterile Spritzen (Fig bedeckt und platziert . 6). Aktivierung von PRP um das PRP erhalten eine thrombozytenreichem Plasma-Gel, 1 ml PRP zu aktivieren, wurde in jedem der vier dappen Gerichte (Abb verzichtet. 7). 10% Calciumchlorid wurde in einem Verhältnis von 1 zu jedem CaCl2 Dappenglas hinzugefügt: 5 PRP nach Volumen (0,2 ml CaCl2: 1 ml PRP). Serum wurde dann zu der verkalkten PRP in jedem Dappenglas in einem Verhältnis von 1 Serum: 2 PRP Volumen (0,5 ml Serum: 1 ml PRP). Der Komplex wurde bei Raumtemperatur belassen und die Zeit für PRP Gelbildung zu sitzen wurde aufgezeichnet (Fig. 8). Die obige Aktivierungsprozess wurde auch durch Absaugen der entsprechenden Mengen an verkalkte PRP und Serum in eine 5 ml erreicht. Spritze. Der aktivierte Komplex könnte dann gezielt über die Spritze an einer beliebigen Stelle geliefert werden. Wenn Knochentransplantation durchgeführt wurde, autogenem Knochen, Allograft, Xenotransplantat oder ein Verbundtransplantat wurde verkalkte PRP zugegeben, dann wurde Serum hinzugefügt, um eine PRP-Gel in Gegenwart des Transplantatmaterials (Abb 9 & amp. 10) zu erzeugen. Die Zeit für die Gelbildung PRP wurde aufgezeichnet, und die PRP-Gel-Transplantat-Komplex wurde dann in situ platziert. In allen Fällen, in denen resorbierbaren Membranen verwendet wurden, für die Abgabe von Wachstumsfaktoren in situ, Zell Okklusivität und /oder der gesteuerten Geweberegeneration wurden die Membranen in verkalkten PRP getaucht, mit Serum aktiviert dann sofort in situ zwischen Knochen platziert und Weichgewebe vor der PRP-Gel wurde geformt. Die Zeiten für PRP Gelbildung in situ wurden aufgezeichnet. Als plättchenarmes Plasma (PPP) als Beklebungsmittel verwendet wurde, wurde es auch mit Serum und 10% Calciumchlorid aktiviert. 2.5 PPP Volumen (0,4 ml CaCl2: 1 ml PPP) Nach der Ausgabe 1 ml PPP in einer Dappenglas Calciumchlorid wurde in einem Verhältnis von 1 CaCl2 zugegeben. Das Serum wurde dann in einem Verhältnis von 1 Serum: 1 PPP Volumen (1,0 ml Serum: 1 ml PPP). Der Komplex wurde 10 Minuten bei Raumtemperatur stehen, dann die chirurgische Einschnittlinie und Nahteintrittspunkte verwendet abzudichten (Fig. 11). Es wurde 5 Minuten in situ ungestört gelassen. Dieses Verfahren wurde auch durch Absaugen der jeweiligen Volumina von verkalkten PPP, 2 und Serum in eine 5-ml-Spritze erreicht und links für 10 Minuten vor dem Gebrauch zu stehen. Ergebnisse | Das Volumen der konzentrierten PRP erhalten belief sich auf durchschnittlich 1,1 ml /Röhrchen. Diese im Vergleich günstig mit Gonshor des results.9 Das Gesamtvolumen der PRP aus der 4 erhaltenen citriertem Röhrchen Blut 4.5mls war. Das Volumen des Serums von den Rohren 2 des geronnenen Vollblut nach dem Zentrifugieren erhalten wurde, betrug 2,5 ml. Das PPP-Volumen erhalten wurde, betrug 6,5 ml. Für die Bildung von plättchenreichem Plasma Gel in vitro (Fig. 8), war die Zeitbereich 5-10 Minuten. Der Bereich war 30-60 Sekunden in situ. Das gesamte Blutverarbeitung dauerte etwa 30 Minuten. PRP Gel wurde in Gegenwart von autologem (Fig. 9) und Allotransplantat schnell gebildet (Fig. 10). Ein PPP Gerinnsel wurde in 10 Minuten gebildet werden, wenn Serum zu kalzifizierten PPP (Fig. 11) zugegeben. Dies wurde als autologe Gewebeverschlussmittel für den chirurgischen Schnittführung und Nahteintrittspunkte verwendet. DISKUSSION Physiologische Vorteile von PRP Um die physiologischen Vorteile von PRP zu ernten es ist sehr wichtig, dass Wachstumsfaktoren von lebenden Thrombozyten freigesetzt werden, da sie während des Aktes der Körner Exozytose, die die Plättchen des tertiären structure.2,3,9 der Faktor Wachstum abgeschlossen ist Protein der Tertiärstruktur, mit seiner einzigartigen Konformation der biologisch ist aktive Struktur. Die molekulare Konformation ermöglicht das Protein entsprechend seiner aktiven Stelle zu seinem spezifischen Substrat vorhanden, so dass die Katalyse ablaufen kann. Anitua et AL1 haben eine Reihe von Situationen aufgelistet, in denen die Sekretion von autologem Thrombozyten-Produkte geführt kann die Heilung und die Wundheilung fördern. Die Situationen sind: Kieferchirurgie und Knochentransplantate, Zahnimplantat Chirurgie, Orthopädie und Knochenrekonstruktion, Gesichts-plastische und kosmetische Chirurgie, Hautgeschwüre, Augenchirurgie-Retinal Loch Reparatur, Sportmedizin-Knorpel und Sehnen zu reparieren. Um die am weitesten verbreitete Anwendung von PRP Datum ist in der Zahnmedizin, 4,5,11,12,15, wo verschiedene Autoren haben gezeigt, dass die Verabreichung von PRP in einer Vielzahl von chirurgischen Seiten haben schnell ausgefällt harte und weiche Geweberegeneration und repair.1 dadurch gekennzeichnet, 5-7,15,16 Andere, dass die Verwendung von autologem Thrombozyten positiv auf das Ergebnis auswirken kann, wenn autologe, allogene Transplantate und Xenotransplantate für Alveolarkammaugmentation verwendet werden procedures.15,16 erfordert Knochenregeneration die Rekrutierung , Proliferation und Reifung von Osteoblasten, die aus mesenchymalen Stammzellen cells17,18 abgeleitet sind und eine Studie legt nahe, dass die Thrombozyten releasates auch die Migration von mesenchymalen Stammzellen cells.19 fördern Gonshor9 heißt es, dass die Wachstumsfaktoren PDGF und TGF Kombination gezeigt wurde, Knochenreparatur zu beschleunigen, 20 fördern die Proliferation von Fibroblasten, erhöhen Gewebedurchblutung, die Rate der Bildung von Kollagen, 21,22 Mitose von mesenchymalen Stammzellen, Endothelzellen, sowie Osteoblasten, Schlüsselrollen in der Geschwindigkeit und das Ausmaß der Knochenbildung spielen. eine Serie von 20 Patienten mehrere Extraktionen PRP Gerinnsels unterzogen wurde auf einer Seite des Mundes in die Buchsen aufgebracht, während die andere als Kontrolle diente. Knochenbiopsien wurden an Extraktionsstellen zwischen 10 und 16 Wochen eingenommen. In den meisten der Patienten mit PRP Gerinnsel, war die Knochenregeneration umfangreiche und Knochengewebe war kompakt mit gut organisierten Knochenbälkchen. Im Gegensatz dazu wurde der Hohlraum in der Kontrollgruppe vor allem mit Binde- tissue.1 gefüllt Durch die Verwendung von Tiermodellen einige Autoren haben gezeigt, dass wie beim Menschen, das Hinzufügen PRP-Gerinnsel um aufgeraut Titanimplantaten im Moment ihrer Implantation in goats23 und minipigs24 verbessert sowohl das Ausmaß und die Qualität der Knochenregeneration um die Implantate. Was das Gerinnsel ist initiieren? es ist eine bekannte Tatsache, dass physiologische Blutgerinnung beginnt, wenn es an Kollagen ausgesetzt ist in vivo. Die Tatsache, dass ein Stück des Kollagen Aktivierungszeit reduziert ist ein Beweis, dass eine geeignete Oberfläche für die Einleitung der Gerinnungskaskade bereitgestellt. Die Vorstufen und Enzyme des Gerinnungssystems ist daher vorhanden sein in dem Serum verwendet wird, wodurch die Gerinnungskaskade initiiert wird. Thrombin ist in der Regel nicht im Serum nach Gerinnung abgeschlossen, da seine Produktion durch Antithrombin III Hemmung der Faktoren 1XA, Xa, XIa und XIIa mit Hilfe seines Cofaktors Heparin gestoppt wird, und was übrig bleibt wird mit Thrombomodulin für Fibrinolyse mit der komplexierten Hilfe von Protein C, Protein S, Gewebe-Plasminogen-Aktivator (tPA), Urokinase-Plasminogen-Aktivator (uPA), Plasminogen und Plasmin. Forschung auf der Quantifizierung der Gerinnungsvorläuferkomponenten und Enzyme von Serum durchgeführt werden muss, und ihre Stabilität unter verschiedenen Bedingungen. Weitere Studien müssen auch auf die Stabilität von Wachstumsfaktoren durchgeführt werden, nachdem sie von Blutplättchen freigesetzt wurden. In-situ Ergebnisse | Die Ergebnisse in situ erhalten werden, sind ähnlich zu den Ergebnissen, die durch Anitua et AL1 wenn sie peri-Implantatoberflächen mit verkalkten PRP gemischt mit extrudierten Überstand aus einer zurückgezogenen Gerinnsel unmittelbar nach der Implantation bewässert. iN-vITRO-Ergebnisse | Die längeren Gerinnungszeiten in vitro könnte ein Indiz dafür sein, dass die Konzentrationen der Gerinnungsstoffe und Enzyme können relativ niedrig im Serum, und es braucht Zeit, um die Reaktionen zu entwickeln. Sobald jedoch Aktivierung wurde nachfolgende Blutgerinnung eingeleitet verlief zügig. Dies steht im Einklang mit der autokrinen /parakrinen Art der interzellulären Kommunikation über chemische Mediatoren bei der Thrombozytenaktivierung. Anitua et AL1 besagt, dass die Verabreichung von aktivierten Plättchen in Fibringerinnsels oder Fibrinkleber einen Klebstoff Unterstützung bereitstellt, die Sekretion zu einem gewählten Ort beschränken kann, und die Präsentation von Wachstumsfaktoren an Thrombozyten und /oder Fibrin in eine verstärkte Aktivität gegenüber rekombinanten Proteinen führen kann . Erweiterte In-vitro-Aktivierungszeiten könnte von Vorteil sein, wenn autogenem Knochen, allogene Transplantate und Xenotransplantate sind mit PRP gemischt werden vor der Platzierung in situ für Kammaugmentation Transplantate, Grat Wartung Transplantate, Sinuslift-Transplantate, die Reparatur der Schneidermembran sowie schnelle Weichgewebeheilung und Reifung. FAZIT Das hier vorgestellte Verfahren zeigt, wie autologe Thrombin im Serum des Patienten Thrombozyten aktiviert werden können. Es sollte eine sichere Alternative für die therapeutische Anwendung bieten. Die leichte Verfügbarkeit von autologem PRPgel mit Wachstumsfaktor-Release und autologe Fibrinkleber als Beklebungsmittel zeigt, dass autologe Thrombin in Patienten Serum wirksam Blutplättchen aktivieren kann und somit eine Alternative bieten die Stimulation der Geweberegeneration, Reparatur und Reifung in der Zahnmedizin und Medizin weiter . Achtung * Wachstumsfaktorstufen, zählen und Thrombozytenaktivierung Zeiten sowie mit dem Alter von Individuum zu Individuum variieren und Gesundheitszustand. * Die Alterung von Serum und PRP kann Aktivierungszeiten beeinflussen, da die Proteine in vitro sehr labil sind. * Wenn dieses Verfahren verwendet wird, sollten Schritte unternommen werden, um sicherzustellen, daß eine maximal sterile Umgebung für die Blutentnahme versehen ist, PRP-Verarbeitung und die Aktivierung. Dr. Smith ist seit 25 Jahren in New Westminster, British Columbia in der privaten Praxis. Im Jahr 2004 erfand er eine patientenspezifische Verfahren für die autologe Thrombin-Aktivierung von Blutplättchen in plättchenreiches Plasma (PRP). Oral Health begrüßt diese Original-Artikel. ich möchte Dr. Aron Gonshor von Montreal, Dr. Ross MacGillivray, Dr. Ed Pryzdial, und Dr. Dana Devine des Zentrums für Blutforschung an der Universität von British Columbia zu danken, für ihre von unschätzbarem Wert Diskussionen. Disclosure der Autor behauptet, in einem Unternehmen oder eines der Produkte, die in diesem Artikel erwähnt kein finanzielles Interesse zu haben. Ihr Feedback 1.Eduardo Anitua, Isabel Andia, Bruno Ardanza, Paquita Nurden (3,4), Alan t. Nurden. Autologe Blutplättchen als eine Quelle von Proteinen, für die Heilung und Geweberegeneration. Journal of Thrombosis and Haemostasis 2004; 91: 4-15 2.Rendu F, Brohard-Bohn B. Die Blutplättchen-Freisetzungsreaktion:. Granulate 'Bestandteile, Sekretion und Funktion, Thrombozyten 2001; . 12: 261-73 3.Reed GL. Platelet-Sekretion. 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< p> Acknowledgments
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