Zusammenfassung
Hintergrund
Um die antimykotische Aktivität von Propolis, dreifach Antibiotika-Paste (TAP), 2% Chlorhexidin-Gel und Calciumhydroxid untersuchen mit Propylenglykol auf Candida albicans
infiziertem Wurzelkanal Dentintubuli in zwei unterschiedlichen Tiefen (200 & mgr; m und 400 & mgr; m) und zwei Zeitintervalle (Tag 1 und 7).
Methoden
insgesamt 90 extrahierten menschlichen Zähnen wurden unter der Zement-Grenze und der apikalen Teil der Wurzel geschnitten 6 mm im mittleren Drittel der Wurzel zu erhalten. Der Wurzelkanal wurde mit einem Innendurchmesser von 0,9 mm vergrößert nicht mit Pesso Reibahle Größe. 2 (Mani®, UT, Japan), gefolgt von Kanalbewässerung und im Autoklaven behandelt. Die Proben wurden für 21 Tage infiziert mit C. albicans
. Dann wurden die Proben in fünf Gruppen vor der Platzierung von intrakanalären Arzneimitteln. Gruppe 1 (Propolis), Gruppe 2 (Triple antibiotische Paste), Gruppe 3 (2% Chlorhexidin-Gel), Gruppe 4 (Calciumhydroxid mit Propylenglykol) und Gruppe 5 (sterile Kochsalzlösung als negative Kontrolle). Am Ende der 1 und 7 Tagen, Dentin Späne wurden in zwei Tiefen in die Dentinkanälchen (200 & mgr; m und 400 & mgr; m) gesammelt, und die Gesamtzahl der koloniebildenden Einheiten wurden für die Bewertung der verbleibenden vital lebensfähigen Pilzpopulation berechnet. Die Werte wurden statistisch unter Verwendung von nicht-paramatric Kruskal-Wallis und Mann-Whitney-U analysiert testet die mittlere Reduktion von Candida albicans
zwischen allen intrakanalären Medikamenten zu vergleichen. Wahrscheinlichkeitswerte von P & lt; 0,05 wurden als statistisch signifikante Ergebnisse als Referenz eingestellt.
Ergebnisse
Die Verringerung der Anzahl der koloniebildenden Einheiten statistisch signifikant war in allen Gruppen im Vergleich zur Kontrollgruppe (steriler Kochsalzlösung), außer Propolis am Tag 1 (400 & mgr; m Tiefe) war
Fazit.
Propolis weniger wirksam als verdreifachen Antibiotikum Paste, 2% Chlorhexidin-Gel und Calciumhydroxid mit Propylenglykol gegen C. albicans
am Tag 1 bei 400 & mgr; m tief in den Dentintubuli, aber ebenso wirksam nach 7 Tagen bei beiden Tiefen
Schlüsselwörter Antimykotische Candida albicans
Endodontie Ex-vivo-Arznei elektronische ergänzendes Material
Die Online-Version dieses Artikels (doi:.. 10 1186 /1472-6831 -14-53) enthält zusätzliches Material, das autorisierten Benutzern zur Verfügung steht.
Hintergrund
Mikroorganismen sind die wichtigsten Erreger bei der Entwicklung von Pulpa und periapikalen Entzündung. Es wurde mit einer höheren Rate in Zähnen in Abwesenheit von mikrobieller Verunreinigung /Infektion in den Wurzelkanal [1], die periapikale Läsionen heilt gezeigt. Das primäre Ziel der Endodontie ist Mikroorganismen aus dem infizierten Wurzelkanalsystem zu beseitigen. Chemomechanische Instrumentierungs entfernt die meisten der Mikroorganismen; jedoch ist es schwierig, vollständig die Mikroorganismen zu beseitigen, weil anatomischer Komplexität und die Begrenzung in das Kanalsystem den Zugriff durch Instrumente und Spülungen [2].
Es hat eine wachsende Besorgnis über persistent apikale Parodontitis, in denen Mikroorganismen resistent sind Routinetherapie und die Infektion kann trotz der Behandlung anhalten [3]. Deshalb, vor allem der Bedarf an intrakanalären Medikamente erhöht sich in jenen Fällen, in denen eine Infektion der regelmäßigen Behandlung und das Ergebnis der endodontischen Therapie resistent ist gefährdet. Jahre der mikrobiologischen Untersuchungen über persistente apikale Parodontitis haben, dass Candida albicans gezeigt
die am häufigsten vorkommende Pilze sind, reichen von 7 bis 18% der Infektionen [4]. C. albicans
auch als normale Mundflora auftreten, also das Vorhandensein von C. albicans
in einem infizierten Wurzelkanal ist sehr günstig [5-7].
C. albicans
behält mehrere Virulenzfaktoren, die persistent apikale Parodontitis beitragen können. Die Hyphen Bildung und thigmotropism Eigenschaft erlauben C. albicans tief in die Tubuli eindringen
, und auch phänotypische Veränderung von C. albicans
ökologisch harten Bedingungen anzupassen in hilft, wie sie in stark alkalischen Umgebung [8]. Diese Virulenzfaktoren machen C. albicans zu Calciumhydroxid als resistent
, das ist die am häufigsten verwendete intrakanalären Medikaments [9]. Zusätzlich in den Dentintubuli die Puffersubstanzen Aktivität Calciumhydroxid, indem man den pH-Wert verhindern kann Abfall gesenkt werden [10, 11].
Kalkhydrat Begrenzung hat, die Basis Wasser sauer ist, weil es selbstregulierend ist und nicht erhöhen der pH-Wert, und eine Vielzahl von Agenten haben als inter-Termin Arzneimittel eingeführt. Diese intrakanalären Medikamente müssen in der Lage sein, tief in die Dentintubuli in Gegenwart von Mikroben durchdringen die vollständige Ausrottung der Infektion aus dem gesamten Wurzelkanalsystem zu gewährleisten.
Chlorhexidin (CHX) in der Endodontie als Berieselungsmittel und intrakanalären Medikamenten weit verbreitet . CHX hat eine ziemlich breite Palette von Aktivität gegen aerobe und anaerobe Organismen sowie Candida-Spezies. CHX wirkt durch positiv geladene Molekül freisetz CHX-Molekül zu erlauben, in den Mikroorganismus Zelle einzudringen, was zu Zelltod [10]. Chlorhexidin nachgewiesen wurde hocheffiziente gegen C. albicans
zu sein, wenn im Vergleich zu Calciumhydroxid, insbesondere in Gelformulierungen bei 2% Konzentration [12].
Hoshino et al.
Die Verwendung von Triple-antibiotische Paste eingeführt, die eine Mischung aus Ciprofloxacin, Metronidazol und Minocyclin. Studien haben gezeigt, dass die topische Anwendung dieser Paste desinfiziert die dentinal Läsionen und recalcifies des erweichten Dentin [13-15]. Diese Antibiotika in Kombination berichtet zu können durch Dentintubuli zu durchdringen und auszurotten anaerobe, gram-positive und Gram-negative Mikroorganismen, [16, 17].
Propolis, ein stark haftenden harzartigen Verbindung, hergestellt von Apis mellifera
L. Bienen zeigten antimikrobielle Aktivität und bei der Behandlung von Bakterien-, Pilz- und Entzündungskrankheiten verwendet [18]. Die wichtigsten chemischen Komponente in Propolis sind Flavonoide, Phenolharze und verschiedene aromatische Verbindungen. Flavonoide sind gut Pflanzenstoffe bekannt, die antioxidative, antibakterielle, antimykotische, antivirale und entzündungshemmende Eigenschaften [19, 20]. Propolis ist bekannt für seine Anti-Pilz-Aktivitäten gegen C. albicans
gut bekannt [21-26]. seine Wirkung gegen C. albicans ist jedoch
in den Dentintubuli kaum untersucht.
Daher ist der Zweck dieser ex-vivo-Studie die antimykotische Wirksamkeit von Propolis, dreifach Antibiotika-Paste, 2% Chlorhexidin-Gel zu bewerten und zu vergleichen war und Calciumhydroxid mit Propylenglykol gegen C. albicans
.
Methoden
das Untersuchungsprotokoll wurde von der Forschung und Ethik-Komitee der Internationalen Medizinischen Universität genehmigt. Das verwendete Verfahren war eine Modifikation des einen zuvor beschrieben [27].
Microorganism
Frisch sub kultiviert (24 Stunden) C. albicans
in dieser Studie verwendet wurden. Die C. albicans
Sabouraud Dextrose (SD) Agar und SD-Bouillon (BD Difco ™, Franklin Lakes, New Jersey, USA) gezüchtet wurden.
Dentine Blockproben
insgesamt 90 intakt frisch entnommenen menschlichen Zähne, einschließlich der oberen mittleren Schneidezähne, oberen seitlichen Schneidezähne, Eckzähne im Oberkiefer und Unterkiefer-Eckzähne mit vollständiger Wurzelbildung wurden für diese Studie ausgewählt. Die Zähne wurden mit parodontalen Küretten gereinigt parodontalen Gewebe und Knochen gespeichert und in Kochsalzlösung zu entfernen. Ein Low-Speed-Diamantkante beschichtete Scheibe (Bredent®, Wittighausen, Senden, Deutschland) montiert unter Wasserkühlung an einer Fräsmaschine die Zähne unterhalb der Schmelz- Zement-Grenze und der apikalen Teil der Wurzel zu Abschnitt verwendet wurde, 6 mm von der zu erhalten mittlere Drittel der Wurzel. Wurzelzement wurde mit langen zylindrischen Diamantschleifern, in einem Hochgeschwindigkeits-Handstück (Kavo®, Charlotte, North Carolina, USA) unter Wasserkühlung entfernt, um einen Dentin-Block zu erhalten. Pesso Reibahle Nr. 2 (Mani®, Utsunoniya, Tochigi, Japan) in einem Low-Speed-Handstück (Kavo, Charlotte, North Carolina, USA) wurde verwendet, um den Innendurchmesser (0,9 mm) von Wurzelkanälen zu standardisieren. Die Dentin Blöcke wurden mit Ultraschall Bewässerung (EndoActivator, Dentsply, Weybridge, Surrey, UK) unter Verwendung von 5,25% Natriumhypochlorit (Clorox®, Oakland, Kalifornien, USA) unterzogen und dann 17% EDTA (Calasept®, Nordiska Dental, Ängelholm, Skåne Land , Schweden) für eine Minute Schmierschicht zu entfernen. Die Dentin Blöcke wurden gründlich mit steriler Kochsalzlösung nach jeder Spülung gespült. Als nächstes wurden die Dentin Blöcke der Sterilisation im Autoklaven unterworfen (LTE®, Oldham, Lancashire, Großbritannien) für 20 Minuten bei 121 ° C. Die äußeren Oberflächen der Proben
wurden mit Nagellack abgedeckt Kontakt des C zu verhindern albicans
Medikament mit der Außenfläche. Zehn Petrischalen Wachs mit einer flachen Oberfläche enthalten, wurden hergestellt und Oberfläche sterilisiert unter Verwendung von 70% igem Ethanol und luftgetrocknet, in einem sterilen Biosicherheitsschrank vor dem Gebrauch. Die Dentin Blöcke wurden righted auf, und die apikal Enden wurden in die Petrischalen mit Wachs fixiert, mit einem dünnen kleinen Platz sterilisierten Kunststoffstreifen, die apikal Öffnung zum Verwischen von der Eingabe der Kanäle jede erweichte Wachs zu verhindern.
Inokulation von dentinal Blöcke mit C. albicans
C. albicans
in 20,0 ml SD-Brühe suspendiert. Die Zellsuspension wurde eingestellt, um die Trübung von 1,5 × 10 [8] CFU mL entsprechen
-1 (entspricht 0,5 McFarland-Standards). Die Pilzinokulum wurde mit der Verwendung von sterilen 5,0 ml Spritzen (Terumo®, Somerset, New Jersey, USA) mit 30-Gauge-Nadeln (Terumo, Somerset, New Jersey, USA) in einer sterilen Laminar-Flow-Haube in die Dentin Blöcke übertragen. Der koronale Teil der Dentin Blöcke wurden dann versiegelt sofort Parafilm (Parafilm M ®, Brand, Wertheim, Baden-Württemberg, Deutschland) verwendet wird. Die Dentin-Blöcke bei 37 ° C inkubiert wurden, für 21 Tage, mit Erneuerung von C. albicans
alle 3 Tage.
Platzierung von intrakanalären Medikamente
die Impfung Periode Nach wurden der Kanal von Dentin Blöcke mit sterilem bewässerte Kochsalzlösung und mit sterilen Papierspitzen getrocknet. Die 90 Dentin Blöcke wurden in fünf Gruppen aufgeteilt, entsprechend der intrakanalären Medikament verwendet wird, wie folgt:
Gruppe I (20 Proben): 95% Propolis (Stakich, Royal Oak, Michigan, USA) wurde mit Kochsalzlösung gemischt in einem Verhältnis von 1,5: 1 (G /V) zu einer Paste Konsistenz zu erhalten
Gruppe II (20 Exemplare). Mix von gleichem Gewicht (1: 1: 1) Boden Metronidazol ( UPL, Ankleshwar, Gujarat, Indien), Ciprofloxacin (Apex Apotheke, Petaling Jaya, Selangor, Malaysia) und Minocyclin (YSP, Kuala Lumpur, Selangor, Malaysia) wurde in einem Verhältnis von 1,5 mit steriler Kochsalzlösung gemischt: 1 (wt /vol) .. 2% Chlorhexidin-Gel (Consepsis V®, Ultradent, South Jordan, Utah, USA)
Gruppe III (20 Proben) zu erhalten > Gruppe IV (20 Proben): nicht-Einstellung Ca (OH) 2 (Produits Dentaires SA, Vevey, Waadt, Schweiz) wurde in einem Verhältnis von 1,5 mit Propylenglykol gemischt: 1 (G /V) ein zu erhalten pastöse Konsistenz.
Gruppe V (10 Proben) steriler Kochsalzlösung als unbehandelte Kontrollgruppe abgestimmte Basisliniendaten auf das Pilzwachstum im Laufe der Zeit zu liefern.
Jede Gruppe wurde weiter unterteilt in zwei Untergruppen: Untergruppen I (A1 und A2), Untergruppen II (B1 und B2), Untergruppen III (C1 und C2), IV (D1 und D2) Untergruppen und Untergruppen V (E1 und E2) entsprechend den Versuchsperioden .
die intrakanalären Medikamente in den Kanal mit Hilfe von sterilen 5,0 ml Spritzen (Terumo®, Somerset, New Jersey, USA) und Gel-Ätzmittel Nadelspitze (Kerr®, orange, Kalifornien, USA), bis die Kanäle gelegt wurden, waren vollständig gefüllt ist. Im Anschluss an die Platzierung aller intrakanalären Medikamente innerhalb der dentinal Blöcke wurden die koronalen Öffnungen alle mit Parafilm (Parafilm M ®, Brand, Wertheim, Baden-Württemberg, Deutschland) abgedichtet. Die Blöcke wurden bei 37 ° C nach den experimentellen Perioden (1 und 7 Tage) gehalten. Sammlung von dentinal Späne Bei
Am Ende der Versuchszeit wurden die Dentin-Blöcke aus den Petrischalen entfernt und die Kanäle mit steriler Kochsalzlösung und die Kanalwände wurden gereinigt unter Verwendung von Ultraschallspitzen wurden bewässert, um eine vollständige Entfernung des Medikaments sicherzustellen. Die Kanäle wurden mit sterilen Papierspitzen getrocknet. Proben von dentinal Späne wurden nach Tag 1 Medikaments zur A1, B1, C1, D1 und E1 und nach Tag 7 für A2, B2, C2, D2 und E2 gesammelt.
Dentin-Späne wurden mit Pesso Reibahle (Mani® gesammelt, Utsunoniya, Tochigi, Japan) Größe Nr. 4 (1,3 mm Durchmesser), gefolgt von Größe Nr. 6 (1,7 mm Durchmesser), in einem niedrigen Geschwindigkeitshandstück (Kavo®, Charlotte, North Carolina, USA). Diese Größen der pesso Reibahlen erlauben eine Tiefe von 200 & mgr; m und 400 & mgr; m von dentinal Späne gesammelt werden (Abbildung 1). Dentin- Späne wurden sofort in ein Mikrozentrifugenröhrchen (Axygen®, Corning, Tweksburry, Massachusets, USA), die 1,0 ml sterile SD Brühe überführt. Abbildung 1 Schematische Darstellung des Querschnitts der Wurzelkanal Dentin und Bohrergröße Auswahl. Pesso Reibahle (Mani®, UT, Japan) Größe Nr. 4 (1,3 mm Durchmesser) und Nr. 6 (1,7 mm) erlaubt eine Tiefe von 0,2 mm (200 um) und 0,4 mm (400 & mgr; m) von dentinal Späne jeweils einen 0,9 mm Durchmesser Kanal gesammelt werden. Antimikrobielle Beurteilung
Eine sterile Mikrospitze wurde verwendet, um nehmen 0,1 ml Brühe, die dentinal Späne, in ein anderes Röhrchen überführt 0,9 ml sterile SD Brühe enthält. Der Inhalt jedes Röhrchen wurde aus 10 seriell verdünnt -1 bis 10 -7. 300 & mgr; l der verdünnten Späne wurde gleichmäßig verteilt einen L-förmigen Glasstab und verdreifachten bei drei Gelegenheiten. Diese Platten wurden für 24 Stunden bei 37 ° C inkubiert und die Kolonien wurden gezählt und Lesungen tabellarisch wurden. Die statistische Analyse
SPSS Computer-Software Version 18.0 (SPSS Inc., Chicago, Illinois, USA)
verwendet wurde, durchzuführen statistische Analyse. Die Werte wurden unter Verwendung von nicht-paramatric analysiert Kruskal-Wallis und Mann-Whitney-U-Tests die mittlere Reduktion von Candida albicans
zwischen allen intrakanalären Medikamenten zu vergleichen. Wahrscheinlichkeitswerte von P & lt; 0,05 wurden für statistisch signifikante Ergebnisse als Referenz.
Ergebnisse
